ADF培養(yǎng)基主要由磷酸鹽、檸檬酸、葡萄糖、葡萄糖酸、等組成,并含有眾多微量元素,如錳、鋅、銅、鐵、等金屬離子等,經(jīng)無(wú)菌處理。該試劑含 ACC(1-氨基羰酰-1-環(huán)丙烷羧酸)。DF培養(yǎng)基常與ADF培養(yǎng)基聯(lián)合使用,用于分析細(xì)菌的 ACC脫氨酶特性,菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)要好于 DF培養(yǎng)基,說(shuō)明該菌株能夠以ACC氮源進(jìn)行生長(zhǎng),即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。
 
  自備材料:
 
  1、DF培養(yǎng)基、NDF培養(yǎng)基(選做)
 
  2、搖床
 
  3、比色杯
 
  4、分光光度計(jì)
 
  5、無(wú)菌離心管或培養(yǎng)器皿
 
  6、接種環(huán)
 
  操作步驟 (僅供參考) :
 
  1、取無(wú)菌離心管或培養(yǎng)器皿,加入3ml ADF培養(yǎng)基、DF 培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)。
 
  2、將純化的菌株同時(shí)接種于上述ADF培養(yǎng)基、DF培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)中,置于搖床 150r/min 振搖培養(yǎng) 72h。
 
  3、觀察同一菌株在 ADF 培養(yǎng)基、DF培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)三種不同培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況。
 
  4、用分光光度計(jì)在600nm處測(cè)定各培養(yǎng)菌液的OD值,以便判斷菌株長(zhǎng)勢(shì)。
 
  結(jié)果:
 
  當(dāng)菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)明顯好于DF培養(yǎng)基時(shí),說(shuō)明該菌株能夠以ACC為氮源進(jìn)行生長(zhǎng),即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。
 
  注意事項(xiàng):
 
  1、 置于 DF 培養(yǎng)基、NDF 培養(yǎng)基中培養(yǎng)是可選步驟,不是必須步驟。
 
  2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。
 
  3、 如果沒(méi)有分光光度計(jì),也可以使用普通的酶標(biāo)儀測(cè)定。